БИОХИМИЯ, 2005, том 70, вып. 10, с. 1346–1354

УДК 577.112

Функциональная роль аминоконцевого домена продукта гена 11 бактериофага Т4

© 2005 А.Ю. Вишневский 1, Л.П. Курочкина 1, Н.Н. Сыкилинда 1, Н.В. Соловьева 1, М.М. Шнейдер 1, П.Г. Лейман 2, В.В. Месянжинов 1*

Институт биоорганической химии им. М.М.Шемякина и Ю.А. Овчинникова РАН

Department of Biological Sciences, Purdue University

Поступила в редакцию 22.10.2004
После доработки 23.11.2004

КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: бактериофаг Т4, базальная пластинка, продукт гена 11, продукт гена 10, делеционные варианты, фолдинг белка, моноклональные антитела.

Аннотация

Продукт позднего гена 11 бактериофага Т4, пространственная структура которого определена нами ранее с разрешением 2,0 Å, входит в состав базальной пластинки вируса. Полипептидная цепь продукта гена 11 (пг11) содержит 219 аминокислотных остатков, и функционально активный белок является гомотримером, который содержит три домена. В настоящей работе мы изучили роль N-концевого домена пг11 в формировании функционально активного тримера пг11. С этой целью получены моноклональные антитела, узнающие нативную конформацию тримера пг11, и делеционные варианты пг11. Протяженные делеции вплоть до полного удаления N-концевого домена, содержащего 64 аминокислотных остатка, не влияют на тримеризацию пг11, но существенно изменяют структуру белка и приводят к потере егo активности. Однако при делеции первых 17 N-концевых остатков пг11 функционально активен и способен достраивать дефектные по гену 11 частицы фага при комплементации in vitro, но в отличие от полноразмерного белка не образует комплекс с пг10. Этот участок полипептидной цепи, вероятно, необходим для образования стабильного комплекса двух белков (пг11–пг10) на ранних этапах сборки базальной пластинки фага in vivo. Изучение делеционных вариантов пг10 в опытах in vitro позволяет предположить, что за взаимодействие с пг11 отвечает центральная часть тримера пг10.

Текст статьи

Пожалуйста, введите код, чтобы получить PDF файл с полным текстом статьи:

captcha

Сноски

* Адресат для корреспонденции и запросов оттисков.