БИОХИМИЯ, 2005, том 70, вып. 8, с. 1137–1144

Краткие сообщения

УДК 577.113.4: 577.152.314.14

Аффинная модификация эндонуклеазы рестрикции SsoII ДНК-дуплексами, содержащими 2'-альдегидную группу*

© 2005 А.Е. Судьина 1, Т.С. Зацепин 2, В. Пингоуд 3, А. Пингоуд 3, Т.С. Орецкая 1,2, Е.А. Кубарева 1**

1 НИИ физико-химической биологии им. А.Н. Белозерского, МГУ им. М.В. Ломоносова

2 Химический факультет МГУ им. М.В. Ломоносова

3 Institut fиеr Biochemie, Justus-Liebig-Universitаеt

Поступила в редакцию 07.02.2005
После доработки 25.03.2005

КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: эндонуклеаза рестрикции SsoII, ДНК-белковые взаимодействия, модифицированные ДНК-дуплексы, аффинная модификация.

Аннотация

Впервые изучены свойства 2′-альдегидсодержащих ДНК-дуплексов в качестве аналогов субстратов эндонуклеазы рестрикции SsoII. В условиях восстановительного аминирования проведено ковалентное присоединение этих реакционноспособных олигонуклеотидов к эндонуклеазе SsoII. Подобраны условия трипсинолиза ДНК-белкового конъюгата и выделения олигонуклеотидопептидного конъюгата. Методом масс-спектрометрии в варианте MALDI-TOF показано, что ковалентную связь с углеводным фрагментом центрального пиримидинового нуклеозида участка узнавания эндонуклеазы рестрикции SsoII образует остаток Lys173 фермента, который, по-видимому, принимает участие в стадии узнавания субстрата на уровне «считывания» структуры дуплекса.

Текст статьи

Пожалуйста, введите код, чтобы получить PDF файл с полным текстом статьи:

captcha

Сноски

* Первоначально английский вариант рукописи был опубликован на сайте «Biochemistry» (Moscow), Papers in Press, BM05-026, 03.07.2005.

** Адресат для корреспонденции и запросов оттисков.