БИОХИМИЯ, 2005, том 70, вып. 8, с. 1030–1040
УДК 577.152.361
Влияние замен консервативных остатков глицина Gly100 и Gly147 на стабильность неорганической пирофосфатазы Escherichia coli*
1 Химический факультет МГУ им. М.В. Ломоносова
2 НИИ физико-химической биологии им. А.Н. Белозерского МГУ им. М.В. Ломоносова
Поступила в редакцию 28.02.2004
После доработки 26.11.2004
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: неорганическая пирофосфатаза, глобулярная структура, дифференциальная сканирующая калориметрия, химическая денатурация, стабильность.
Аннотация
Выравнивание аминокислотных последовательностей неорганических пирофосфатаз (РРаз), выделенных из различных источников, выявляет консервативность остатков глицина Gly100 и Gly147. Эти остатки входят в подвижные участки полипептидной цепи, имеющие сходное строение в различных РРазах. Для выяснения возможной роли этих участков в функционировании фермента были получены мутантные варианты РРазы E. coli с заменами Gly100Ala и Gly147Val в консервативных петлях. Изучено влияние введенных замен на стабильность глобулярной структуры РРазы. Методом дифференциальной сканирующей калориметрии определена «эффективная» энтальпия термической денатурации нативной РРазы и ее мутантных вариантов Gly100Ala и Gly147Val. Изучена химическая денатурация РРазы под действием гуанидингидрохлорида. Установлено, что мутации Gly100 и Gly147 приводят к существенной дестабилизации глобулярной структуры.
Текст статьи
Сноски
* Первоначально английский вариант рукописи был опубликован на сайте «Biochemistry» (Moscow), Papers in Press, BM04-048, 27.02.2005.
** Адресат для корреспонденции и запросов оттисков.