БИОХИМИЯ, 2005, том 70, вып. 7, с. 941–946
УДК 577.212.3
Рекомбинантный рибосомный белок S16 человека: получение, очистка, рефолдинг и стабильность*
Институт химической биологии и фундаментальной медицины СО РАН
Поступила в редакцию 26.05.2004
После доработки 25.06.2004
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: рибосомный белок S16 человека, экспрессия, рефолдинг.
Аннотация
кДНК рибосомного белка S16 человека клонирована в экспрессионный вектор pET-15b. Проведена препаративная наработка рекомбинантного белка S16 в клетках Esherichia coli и получен высокоочищенный препарат белка. Оптимизирован метод рефолдинга белка из телец включения. С помощью КД-спектроскопии показано, что 21 ± 4% первичной структуры белка образуют α-спирали, а 24 ± 3% − β-структуры. Изучена устойчивость ренатурированной формы белка при различных значениях рН и концентрациях мочевины. Установлено, что при рН >8,0 происходит резкая денатурация белка, тогда как при повышении концентрации мочевины разворачивание белка происходит постепенно.
Текст статьи
Сноски
* Первоначально английский вариант рукописи был опубликован на сайте «Biochemistry» (Moscow), Papers in Press, BM04-129, 10.10.2004.
** Адресат для корреспонденции и запросов оттисков.