Влияние субстратов транскетолазы на реконструкцию холофермента и его стабильность^*

Аннотация

Изучено влияние субстратов на взаимодействие апотранскетолазы с коферментом – тиаминдифосфатом (ТDР) – и на стабильность реконструированного холофермента. Показано, что субстраты-доноры повышают сродство кофермента к транскетолазе, в то время как субстрат-акцептор такой способностью не обладает. При наличии в среде ионов магния исходно эквивалентные по связыванию ТDР активные центры транскетолазы становятся неэквивалентными в присутствии субстрата-донора. Стабильность холотранскетолазы зависит от типа катиона, используемого при ее реконструкции: холофермент, полученный в присутствии ионов кальция, более стабилен, чем холофермент, полученный в присутствии магния. В присутствии субстрата-донора стабильность холофермента повышается вне зависимости от того, какой катион был использован при его реконструкции. Субстрат-донор не оказывает влияния на взаимодействие апотранскетолазы с неактивным аналогом кофермента – N3′-пиридилтиаминдифосфатом – и не стабилизирует комплекс транскетолазы с этим аналогом. Полученные экспериментальные данные позволяют полагать, что эффект субстрата на взаимодействие кофермента с апотранскетолазой и на стабильность реконструированного холофермента обусловлен образованием дигидроксиэтилтиаминдифосфата – промежуточного продукта транскетолазной реакции, имеющего более высокое по сравнению с ТDР сродство к апобелку.

Текст статьи

Пожалуйста, введите код, чтобы получить PDF файл с полным текстом статьи: