БИОХИМИЯ, 2005, том 70, вып. 6, с. 782–789
УДК 577.152.1
Использование системы обращенных мицелл для характеристики олигомерной структуры NAD+-восстанавливающей гидрогеназы из Ralstonia eutropha H16
1 Институт биохимии им. А.Н. Баха РАН
2 Московский государственный университет им. М.В. Ломоносова, химический факультет
Поступила в редакцию 07.05.2004
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: Ralstonia eutropha, NAD+-восстанавливающая гидрогеназа, олигомерная структура, обращенные мицеллы.
Аннотация
Включение NAD+-зависимой гидрогеназы из водородокисляющих бактерий Ralstonia eutropha в систему обращенных мицелл разного размера позволило диссоциировать ее на каталитически активные фрагменты: гетеродимеры и субъединицы. Охарактеризованы каталитические свойства полученных фрагментов в реакциях с разными субстратами. Показано, что: 1) нативная тетрамерная форма фермента катализирует все типы исследованных реакций; 2) гидрогеназный димер HoxHY является минимальной структурной единицей, катализирующей гидрогеназную реакцию с искусственным донором электронов – восстановленным метилвиологеном; 3) все структурные фрагменты, содержащие FMN и NAD+/NADH-cвязывающие центры, обладают каталитической активностью в диафоразных реакциях с одно- и двухэлектронными акцепторами; 4) малые субъединицы (HoxY и HoxU) также обнаруживают активность в диафоразных реакциях с искусственными акцепторами. Этот результат может служить косвенным подтверждением, что вторая молекула FMN может быть ассоциирована с одной из малых субъединиц (HoxY или HoxU) гидрогеназы из R. eutropha.
Текст статьи
Сноски
* Адресат для корреспонденции и запросов оттисков.
** Настоящий адрес: Swammerdam Institute for Life Sciences, Biochemistry, University of Amsterdam, Plantage Muidergracht 12, NL-1018 TV Amsterdam, The Netherlands.