БИОХИМИЯ, 2005, том 70, вып. 3, с. 370–377
УДК 577.152.344
О пищеварительных протеиназах личинок большого мучного хрущака Tenebrio molitor: очистка и характеристика трипсиноподобной протеиназы*
1 Институт биохимии им. А.Н. Баха РАН
2 НИИ физико-химической биологии им. А.Н. Белозерского МГУ им. М.В. Ломоносова
3 Кафедра энтомологии биологического факультета МГУ им. М.В. Ломоносова
4 Grain Marketing and Production Research Center, USDA Agricultural Research Service
Поступила в редакцию 14.10.2004
После доработки 01.11.2004
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: пищеварительная протеиназа, Tenebrio molitor, трипсин.
Аннотация
Новая трипсиноподобная протеиназа из задней части средней кишки личинок Tenebrio molitor очищена до гомогенного состояния с помощью ионообменной хроматографии на ДЭАЭ-сефадексе и гель-фильтрации на Superdex-75. Выделенный фермент имеет молекулярную массу 25,5 кДа и ИЭТ 7,4. Его рН и температурный оптимумы соответственно равны 8,5 и 55°, а Кm с Bz-Arg-pNa в качестве субстрата – 0,04 мМ. По данным ингибиторного анализа фермент является сериновой протеиназой типа трипсина и стабилен при рН 5,0–9,5. Он гидролизует пептидные связи с Arg или Lys в положении Р1, предпочитая сравнительно длинные пептидные субстраты. N-Концевая аминокислотная последовательность протеиназы имеет вид IVGGSSISISSVPXQIXLQY. Она на 50–72% идентична соответствующим последовательностям других трипсиноподобных протеиназ насекомых и на 44–50% – трипсинов млекопитающих. Выделенный фермент ингибируется растительными ингибиторами протеиназ и представляет собой удобную мишень для контроля за процессом пищеварения у изученного вредителя зерновых запасов.
Текст статьи
Сноски
* Ускоренная публикация.
** Адресат для корреспонденции и запросов оттисков.