БИОХИМИЯ, 2005, том 70, вып. 1, с. 77–84
УДК 577.218
Клонирование и экспрессия нового иммунотоксина cpIL-4(13D)–PE38KDEL с повышенной активностью*
1 Institute of Applied Ecology, Chinese Academy of Sciences
2 Graduate School of the Chinese Academy of Sciences
3 Beckman Research Institute, City of Hope National Medical Center
Поступила в редакцию 31.03.2004
После доработки 02.07.2004
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: иммунотоксин, интерлейкин 4, экзотоксин A, Pseudomonas.
Аннотация
Рецепторы интерлейкина 4 (IL-4R) экспрессируются на поверхности самых разных раковых клеток человека и могут быть хорошей мишенью при лечении опухолей, несущих IL-4R, иммунотоксинами, взаимодействующими с IL-4. В представленной работе методом перекрывающейся полимеразной цепной реакции (ПЦР) был сконструирован ген, кодирующий мутеин интерлейкина 4 человека cpIL-4(13D). Химерный иммунотоксин, полученный соединением последовательностей мутеина cpIL-4(13D) и модифицированного экзотоксина A из бактерий рода Pseudomonas (PE38KDEL), был экспрессирован в клетках Escherichia coli AD494 (DE3). Уровень экспрессии комбинированного продукта по данным Ds-Na-ПААГ-электрофореза составил ~30% общего клеточного белка. Цитотоксичность химерного белка определяли после очистки аффинной и ионообменной хроматографией. Показано, что по сравнению с другими связывающимися с IL-4R иммунотоксинами cpIL-4(13D)–PE38KDEL более токсичен по отношению к опухолевым клеткам, несущим IL-4R, и может служить перспективным средством лечения опухолей, образованных такими клетками.
Текст статьи
Сноски
* Первоначально английский вариант рукописи был опубликован на сайте «Biochemistry» (Moscow), Papers in Press, ВМ04-086, 31.10.2004.
** Адресат для корреспонденции и запросов оттисков.