БИОХИМИЯ, 2004, том 69, вып. 12, с. 1700–1705
УДК 577.152.3
pH-зависимость стабильности пенициллинацилазы из Escherichia coli
1 Факультет биоинженерии и биоинформатики МГУ им. М.В. Ломоносова
2 Институт физико-химический биологии им. А.Н. Белозерского МГУ им. М.В. Ломоносова
Поступила в редакцию 13.05.2004
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: пенициллинацилаза, pH-профиль стабильности, термостабильность.
Аннотация
Исследована кинетика инактивации пенициллинацилазы из Escherichia coli при 25 и 50° в широком интервале pH. Фермент стабилен в нейтральной среде, однако быстро теряет активность в кислых и щелочных средах. Во всех случаях инактивация описывалась кинетикой реакции первого порядка. Анализ pH-зависимости эффективной константы инактивации указывает на ключевую роль ионных пар для поддержания стабильной конформации пенициллинацилазы. Разрушение солевых мостиков в результате протонирования/депротонирования аминокислотных остатков, образующих ионные пары, обусловливает инактивацию за счет образования нестабильных «кислотных» EH43+, EH32+, EH2+ и «щелочной» E– форм фермента. При повышении температуры выше 35° в структуре фермента происходит конформационный переход, который сопровождается разрушением одного из солевых мостиков и изменением каталитических свойств.
Текст статьи
Сноски
* Адресат для корреспонденции и запросов оттисков.