Экспрессия поверхностного антигена вируса гепатита B в трансгенных растениях картофеля и его характеристика

Аннотация

Получены трансгенные растения картофеля, экспрессирующие ген поверхностного антигена вируса гепатита B (HBsAg) под контролем двойного промотора 35S РНК вируса мозаики цветной капусты (CaMV 35SS) и промотора гена пататина клубней картофеля. Проведен биохимический анализ полученных растений. Количество поверхностного антигена вируса гепатита B (HBs-антигена) в листьях, микроклубнях и клубнях трансгенных растений картофеля, выращенных в условиях in vitro и in vivo, составляло 0,005–0,035% от общего количества растворимого белка. Содержание HBs-антигена в клубнях картофеля достигало 1 мкг/г массы клубня и было максимальным в растениях, экспрессирующих ген HBsAg под контролем двойного промотора CaMV 35SS. У трансгенных растений картофеля, экспрессирующих ген HBsAg под контролем клубнеспецифического пататинового промотора, HBs-антиген был обнаружен исключительно в микроклубнях и клубнях и отсутствовал в листьях. Проведен вестерн-блотт-анализ HBs-антигена после его иммуносорбентной очистки на белок А-cефарозе. Молекулярная масса очищенного белка равна 24 кДа, что соответствует молекулярной массе основного белка оболочки вируса гепатита B. С помощью гель-фильтрации установлено, что продукт экспрессии гена HBsAg в трансгенных растениях картофеля присутствует в высокомолекулярной мультимерной форме. Таким образом, в клетках трансгенных растений картофеля, как и в клетках рекомбинантных штаммов дрожжей-продуцентов HBsAg, идет сборка мономерных форм HBs-антигена в иммуногенные мультимерные агрегаты, которые могут быть использованы в качестве субстанции для получения вакцины против вируса гепатита B.

Текст статьи

Пожалуйста, введите код, чтобы получить PDF файл с полным текстом статьи: