Белок-ингибитор субтилизина из клубней картофеля^*

Аннотация

Из клубней картофеля (Solanum tuberosum L. сорт Истринский) выделен белок с молекулярной массой 21 кДа, обозначенный PKSI. Процедура выделения включала осаждение (NH₄)₂SO₄, гель-хроматографию на сефадексе G-75 и ионообменную хроматографию на КМ-сефарозе СL-6B. Белок эффективно подавлял активность субтилизина Карлсберг (K_i = 1,67 ± 0,2 нм), образуя с ферментом стехиометрический комплекс в соотношении 1 : 1 (моль/моль). Ингибитор не действовал на трипсин, химотрипсин и цистеиновую протеиназу – папаин. Определена N-концевая последовательность белка из 19 аминокислотных остатков, анализ которой выявил высокую степень гомологии с последовательностями известных ингибиторов, составляющих группу С подсемейства картофельных ингибиторов протеиназ типа Кунитца (potato Kunitz-type proteinase inhibitors, PKPIs-С). В результате клонирования продуктов ПРЦ из геномной ДНК картофеля выделен и секвенирован ген, обозначенный PKPI-C2. Показано, что N-концевая последовательность (с 15 по 33-й остаток) белка, кодируемого геном PKPI-C2, идентична N-концевой последовательности (с 1 по 19-й остаток) выделенного белка PKSI. Это с большой степенью вероятности указывает на то, что ингибитор PKSI кодируется именно этим геном.

Текст статьи

Пожалуйста, введите код, чтобы получить PDF файл с полным текстом статьи: