БИОХИМИЯ, 2004, том 69, вып. 9, с. 1213–1222
УДК 577.152.1
Пероксидазное окисление фенольных соединений в присутствии водорастворимых полимеров и белков
Институт биохимии Литовской республики
Поступила в редакцию 14.01.2004
После доработки 01.03.2004
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: грибная пероксидаза, нафтол, 4-гидроксидифенил, альбумин, полиэтиленгликоль, полиэтиленимин, поли-L-лизин, число каталитических оборотов, рассеяние света, микрочастицы.
Аннотация
Исследована кинетика реакций окисления нафтолов и 4-гидроксидифенила, катализируемых пероксидазой из Coprinus cinereus. Начальная скорость реакций линейно зависит от концентрации фермента. Насыщение субстратом наблюдается при концентрациях перекиси водорода 100 мкМ, нафтолов – свыше 25–50 мкМ и 4-гидроксидифенила – свыше 10 мкМ. Кинетические константы реакций окисления Km и Vmax при 100 мкМ перекиси водорода для 1-нафтола равны 74,7 мкМ и 0,53 мкМ/с, 2-нафтола – 175 мкМ и 2,0 мкM/с, 4-гидроксидифенила – 29,68 мкМ и 0,42 мкМ/с соответственно. В процессе реакций окисления фенольных соединений пероксидаза инактивируется. На начальную скорость реакций пероксидазного окисления, скорость инактивации пероксидазы и степень конверсии исследуемых субстратов влияют разные факторы, а также введенные в реакционную среду водорастворимые полимеры и белки (ПЭГ, ПЕИ, ПЛЛ, БСА, САЧ). Присутствие альбумина увеличивает число каталитических оборотов в 1,5–4 раза. При исследовании кинетики пероксидазного окисления наблюдали увеличение интенсивности рассеяния света, что указывает на образование крупных частиц в процессе реакции. Введенные в реакционную среду полимеры, концентрация и ионная сила буферного раствора и ряд других факторов влияют на величину интенсивности рассеяния света. Используя систему подсчета частиц в жидкостях, определили количество частиц, образующихся в результате пероксидазного окисления нафтола и 4-гидроксидифенила, а также распределение их по размерам в интервале 2,5–300 мкМ.
Текст статьи
Сноски
* Адресат для корреспонденции и запросов оттисков.