Исследование вторичной специфичности энтеропептидазы в сравнении с трипсином

Аннотация

Проведено сравнение вторичной специфичности энтеропептидазы и трипсина с помощью пептидных субстратов энтеропептидазы типа A-(Asp/Glu)_n-Lys(Arg)-↓-B, где n = 1–4. Впервые показано, что энтеропептидаза, так же как и другие сериновые протеиназы, обладает протяженным вторичным центром, взаимодействующим с 6-7 аминокислотными остатками, расположенными по обе стороны от расщепляемой пептидной связи. Однако в случае типичных субстратов энтеропептидазы, содержащих четыре отрицательно заряженные остатка Asp/Glu в положениях Р2–P5, превалирующим фактором эффективности гидролиза является электростатическое взаимодействие этих остатков с вторичным центром Lys99 легкой цепи энтеропептидазы. Вторичная специфичность энтеропептидазы отличается от соответствующей специфичности трипсина. Синтетический хромофорный субстрат G₅DK-F(NO₂)G (k_cat/K_m=2380 мM^–1 · мин^–1) оказался более эффективным субстратом энтеропептидазы, чем химерный белок PrAD₄K-P26 (k_cat/K_m = 1260 мM^–1 · мин^–1).

Текст статьи

Пожалуйста, введите код, чтобы получить PDF файл с полным текстом статьи: