Новая аспартатная протеиназа из ретротранспозона Ulysses (Drosophila virilis)

Аннотация

В настоящей работе изучался мобильный генетический элемент Ulysses, обнаруженный у Drosophila virilis. Сравнительный анализ аминокислотных последовательностей аспартатных протеиназ ретровирусов и ретротранспозонов позволил сделать предположение о первичной структуре протеиназы Ulysses. Соответствующий фрагмент кДНК был клонирован и экспрессирован в E.coli. Белок накапливался в клетках в виде тел включения. Pекомбинантный белок был подвергнут рефолдингу и очищен методом аффинной хроматографии на пепстатин-агарозе. Исследован гидролиз ряда олигопептидных субстратов, а также определен рН оптимум действия фермента, находящийся в области рН 5,5. Установлено, что гидролиз B-цепи инсулина полностью подавляется ингибитором аспартатных протеиназ – пепстатином А в микромолярных концентрациях. Молекулярная масса мономера протеиназы Ulysses, определенная методом MALDI-TOF масс-спектрометрии, составила 12738 Да, что хорошо согласуется с расчетным значением.

Текст статьи

Пожалуйста, введите код, чтобы получить PDF файл с полным текстом статьи: