Введение поперечных сшивок между субъединицами Hsp16.3 из Mycobacterium tuberculosis приводит к подавлению диссоциации олигомеров и снижению шаперонной активности

Аннотация

Малые белки теплового шока (sHsp) обладают, как правило, динамичной олигомерной структурой. Предполагается, что диссоциация олигомеров на субъединицы является необходимым условием для проявления шаперонной активности. В настоящей работе справедливость этого предположения проверена для одного из белков теплового шока Mycobacterium tuberculosis, Hsp16.3, с использованием метода химического сшивания. Данные гель-проникающей хроматографии свидетельствуют о том, что введение сшивок между субъединицами приводит к существенному подавлению диссоциации Hsp16.3 на субъединицы при повышенных температурах и к снижению шаперонной активности. Методами электрофореза в полиакриламидном геле в неденатурирующих условиях и флуоресценции показано, что подавление диссоциации олигомеров Hsp16.3, содержащих сшивки между субъединицами, при комнатной температуре сопровождается уменьшением степени экранирования гидрофобных областей, которые обычно спрятаны во внутренней области олигомеров. Полученные данные подтверждают гипотезу о том, что раскрытие субстратсвязывающих центров Hsp16.3 происходит в результате диссоциации крупных ассоциатов на олигомерные формы меньшего размера и что диссоциация олигомеров sHsp на субъединицы является фактором, регулирующим шаперонную активность.

Текст статьи

Пожалуйста, введите код, чтобы получить PDF файл с полным текстом статьи: