БИОХИМИЯ, 2004, том 69, вып. 5, с. 597–611
УДК 577.218
Анализ клеточного цикла и методика исследования динамики уровня экспрессии белков на его различных фазах с использованием синхронизованных клеток
Обзор
Группа «Клеточный цикл» Отдела электронной микроскопии НИИ физико-химической биологии им. А.Н. Белозерского МГУ им. М.В. Ломоносова
Поступила в редакцию 18.06.2003
После доработки 15.09.2003
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: клеточный цикл, белки, синхронизация клеток.
Аннотация
Исследование динамики уровня экспрессии белков в клеточном цикле требует получения достаточно чистых фракций клеток различных его фаз, для чего были разработаны методы синхронизации клеток. В свою очередь успешная синхронизация клеток невозможна без знания продолжительности всех фаз клеточного цикла. Эти обстоятельства обусловили совместное рассмотрение данных вопросов в предлагаемом обзоре. В первой части кратко изложены основные методы анализа продолжительности стадий клеточного цикла. Во второй части обзора суммированы данные о воздействиях используемых для синхронизации клеток. Третья часть обзора посвящена рассмотрению методов расчета процентного содержания клеток различных фаз клеточного цикла во фракциях синхронизованных клеток. В четвертой части рассмотрена методика изучения уровня экспрессии различных белков в клеточном цикле с помощью количественного иммуноблоттинга фракций синхронизованных клеток. Изложенные в обзоре общетеоретические положения проиллюстрированы в Приложении конкретными примерами анализа клеточного цикла, синхронизации и изучения динамики уровня экспрессии в клеточном цикле некоторых белков, проведенном на синхронизованных клетках линии XL2 (Xenopus laevis).