БИОХИМИЯ, 2004, том 69, вып. 3, с. 338–343
УДК 577.152.361
Частичная очистка и характеристика экзополифосфатазы ядер штамма Saccharomyces cerеvisiae с инактивированным геном PPX1, кодирующим основную экзополифосфатазу дрожжей
Институт биохимии и физиологии микроорганизмов им. Г.К. Скрябина РАН
Поступила в редакцию 14.05.2003
После доработки 09.07.2003
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: экзополифосфатаза, полифосфаты, ядра, РРХ1-дефицитный штамм, Saccharomyces cerevisiae.
Аннотация
Инактивация гена PPX1, кодирующего экзополифосфатазу цитозоля PPX1 Saccharomyces cerevisiae, не повлияла на экзополифосфатазную активность изолированных ядер по сравнению с таковой у родительского штамма. Экзополифосфатаза ядер дрожжей S. cerevisiae, дефицитных по гену PPX1, очищена в 10 раз и по данным гель-фильтрации на суперозе 6 имеет молекулярную массу ~200 кДа и в равной степени гидролизует полифосфаты со средней длиной цепи 15 и 208 фосфорных остатков. Активность с триполифосфатом была существенно ниже. Величины Km в присутствии 2,5 мМ Мg2+ для полифосфатов с длинами цепей 15 и 208 фосфорных остатков составили 133 и 25 мкМ соответственно. Mg2+ (2,5 мМ) и Co2+ (0,1 мМ) стимулировали активность фермента в 15 и 31 раза соответственно. РНК не влияла на экзополифосфатазную активность ядер, а полилизин увеличивал ее в 2 раза.
Текст статьи
Сноски
* Адресат для корреспонденции и запросов оттисков.