БИОХИМИЯ, 2004, том 69, вып. 3, с. 328–337
УДК 577.152.3
Внутриклеточные альгинолитические ферменты морской бактерии Pseudoalteromonas citrea КММ 3297
Тихоокеанский институт биоорганической химии ДВО РАН
Поступила в редакцию 24.12.2002
После доработки 15.04.2003
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: альгинат-лиазы, морские бактерии, Pseudoalteromonas citrea, альгиновая кислота, бурые водоросли.
Аннотация
Два внутриклеточных альгинолитических фермента АлI, АлII синтезирует морская бактерия Pseudoalteromonas citrea KMM 3297 – ассоциант голотурии Apostichopus japonicus, выращенная на среде, содержащей глюкозу. Фукоидан из бурой водоросли Fucus evanescens индуцирует появление еще одного альгинолитического фермента – АлIII. Разделение этих ферментов проведено с помощью анионообменной хроматографии. Альгинат-деградирующие ферменты полностью сохраняют активность до 35 (АлI) и 45° (АлII, АлIII). Оптимумы pH альгиназ равны 7–8. По данным гель-фильтрации молекулярные массы ферментов АлI, АлII и АлIII составляют 25, 79 и 61 кДа соответственно. Все исследуемые альгинолитические ферменты являются альгинат-лиазами эндотипа действия. Они деградируют полигулуроновую (поли-Г) и полиманнуроновую кислоты (поли-М) до олигосахаридов со степенью полимеризации 5 ≥ n ≥ 3, имеющих ненасыщенную связь на невосстанавливающем конце между С4–С5-атомами. Смесь всех трех ферментов альгинолитического комплекса проявляет синергический эффект при действии на полимерный субстрат. Кm альгинат-лиазы АлI по поли-Г и поли-М составляют 24 и 34 мкг/мл соответственно. Cродство альгинат-лиазы АлIII к поли-М меньше (Кm = 130,0 мкг/мл), чем к поли-Г (Кm = 40,0 мкг/мл). NaCl (0,2 M), MgCl2 и MgSO4 (0,01 M) активируют все ферменты более чем в 2 раза. Наличие нескольких альгинолитических ферментов разной специфичности в одном организме обеспечивает эффективную деструкцию альгиновых кислот бурых водорослей бактерией P. citrea KMM 3297.
Текст статьи
Сноски
* Адресат для корреспонденции и запросов оттисков.