Механизм клеточной смерти, вызванный фотодинамическим воздействием с применением Foscan на клетки аденокарциномы ободочной кишки человека линии HT29

Аннотация

Апоптоз, вызываемый фотодинамической терапией (ФДТ), рассматривается как один из важнейших факторов, определяющих результат лечения. Однако значение апоптотических событий в гибели клетки должно быть установлено для каждого фотосенсибилизатора в отдельности. Настоящее исследование посвящено изучению вклада апоптоза, фотоиндуцированного с помощью Foscan^® (мета-, тетра-(гидроксифенил)хлорин, mTHPC), в механизм гибели клеток на модели клеточной культуры аденокарциномы HT29. О первичных процессах гибели клеток судили на основе измерений митохондриального ответа на mTHPC-опосредованную ФДТ, выброса цитохрома c и степени деполяризации митохондриальных мембран. Интенсивность апоптоза оценивали по активности каспазы 3 и связыванию флуоресцентно-меченного Ca²⁺-зависимого белка аннексина V (Анн V) фосфатидилсерином (ФС), экстернализованным на мембране через 2, 4 и 24 ч после применения ФДТ. Сразу же после применения mTHPC-ФДТ с дозой облучения, вызывающей смерть более 90% клеток, 28–57% клеток обнаружили выброс цитохрома c, сопровождаемый деполяризацией митохондриальной мембраны. Наибольшая активация каспазы 3 (12-кратное увеличение по сравнению с контролем) была достигнута через 24 ч после облучения дозой, вызывающей смерть 90% клеток (LD₉₀). Аналогичные измерения у апоптотических клеток (12% аннексин V-связывающих клеток) подтвердили умеренный и отложенный апоптотический ответ клеток HT29 на mTHPC- ФДТ.

Текст статьи

Пожалуйста, введите код, чтобы получить PDF файл с полным текстом статьи: