Взаимодействие кератина K1 с нуклеиновыми кислотами на поверхности клеток

Аннотация

C помощью аффинной модификации ³²P-мечеными реакционноспособными производными олигонуклеотидов исследованы поверхностные белки клеток линии A431 и клеточных экстрактов, взаимодействующие с нуклеиновыми кислотами. На поверхности интактных клеток обнаружены белки с молекулярными массами 68, 46, 38, 28 кДа и несколько низкомолекулярных белков, связывающих нуклеиновые кислоты. Показано, что белок с молекулярной массой 68 кДа экспонирован на клеточной поверхности, поскольку обработка клеток трипсином приводит к гидролизу этого белка. Нарушение целостности клеточной мембраны (соскабливание скрепером, обработка трипсином и пермеабилизация клеток стрептолизином O или сапонином) нарушает взаимодействие поверхностных белков клеток с олигонуклеотидами. Аффинная модификация производными олигонуклеотидов ядерной, цитозольной и мембранно-цитозольной фракций клеток приводит к модификации большого числа белков, при этом белки с молекулярными массами 68, 46, 38 и 28 кДа также обнаруживаются среди них, но как минорные компоненты. Поверхностные олигонуклеотид-связывающие белки с молекулярной массой ~68 кДа выделены методом аффинной хроматографии после модификации живых клеток реакционноспособным производным олигонуклеотида Flu-DAP-p(N)₁₆-deg-U_о. Определены последовательности выделенных поверхностных олигонуклеотидсвязывающих белков клеток линии A431, один из которых идентифицирован как кератин K1.

Текст статьи

Пожалуйста, введите код, чтобы получить PDF файл с полным текстом статьи: