Свойства антигеномного HDV-рибозима, состоящего из трех субфрагментов

Аннотация

Сконструирован трехнитевой рибозим, производный от антигеномного HDV-рибозима, состоящий из субфрагментов длиной 16 (L), 17 (S) и 33 нуклеотида (B), и исследованы его ферментативные свойства. Показано, что тройной комплекс B–L–S, образованный субфрагментами в стехиометрическом соотношении, способен к саморасщеплению и кривая кинетики реакции так же демонстрирует двухфазный характер и те же параметры, что и в случае природного цис-рибозима. Исследование кинетики реакции, инициированной введением различных компонентов реакции, а также изучение образования бинарного комплекса между субфрагментами B и L, B и S и тройного комплекса B–L–S показали, во-первых, в присутствии ионов Mg²⁺ субфрагменты B и S способны образовать только стехиометрический комплекс, L и S не образуют комплекса вообще, а B и L образуют два типа комплексов – B–L и, возможно, 2B–L, добавление субфрагмента S препятствует образованию последнего. Во-вторых, реакция, инициированная введением субфрагмента S, протекает заметно медленнее, чем инициированная введением других субфрагментов, что позволяет предположить, что субфрагмент L в отсутствие S образует непродуктивный комплекс с B, который медленно вытесняется S с образованием продуктивного тройного комплекса. Вычислены константы диссоциации для бинарных B–L, B–S и тройного B– L–S комплексов.

Текст статьи

Пожалуйста, введите код, чтобы получить PDF файл с полным текстом статьи: