В митохондриях печени крысы вся нуклеозиддифосфаткиназа наружного компартмента локализована на внешней поверхности наружной мембраны

Аннотация

Данные о точной локализации нуклеозиддифосфаткиназы (НДФК) в наружном компартменте митохондрий противоречивы. Мы показали, что пятикратное промывание осадка митохондрий (при концентрации белка митохондрий ~2 мг/мл) приводит к солюбилизации только около 60% общей присутствующей в исходных митохондриях активности НДФК. Поскольку при этом митохондрии сохраняли активность аденилаткиназы – маркерного фермента межмембранного пространства, сделан вывод, что солюбилизированная активность НДФК локализована на наружной поверхности наружной мембраны. Обработка митохондрий растворами дигитонина разной концентрации в среде с низкой (сахароза, маннит) и высокой (KCl) ионной силой показала, что в обеих средах кривая солюбилизации оставшейся НДФК практически совпадает с кривой солюбилизации моноаминооксидазы (маркерного фермента наружной мембраны митохондрий) и отличается от кривых, полученных для аденилаткиназы и малатдегидрогеназы. Сделан вывод, что остаточная активность НДФК также локализована на наружной мембране митохондрий и что электростатическое взаимодействие не играет существенной роли в связывании НДФК с мембранами митохондрий. Для выяснения того, на какой стороне наружной мембраны локализована остаточная активности НДФК, из хранившейся во льду суспензии митохондрий через разные промежутки времени отбирали аликвоты и после центрифугирования определяли оставшиеся в осадке активности НДФК и аденилаткиназы полярографическим методом. Сделан вывод, что в митохондриях печени крысы вся активность НДФК наружного компартмента локализована на внешней стороне наружной мембраны. Предполагается присутствие по крайней мере трех фракций НДФК, которые составляют ~70, 15 и 15% от активности НДФК в наружном компартменте и различаются по прочности связи с мембранами.

Текст статьи

Пожалуйста, введите код, чтобы получить PDF файл с полным текстом статьи: