Денатурация гликозилированного и дегликозилированного бромелайна в присутствии гуанидин гидрохлорида

Аннотация

Гликозилирование – одна из наиболее часто встречающихся ковалентных модификаций белков. В качестве модели для исследования роли гликозилирования белков мы использовали бромелайн из стебля ананаса – тиоловую протеазу, содержащую единственную N-гликозилированную полипептидную цепь. Для получения дегликозилированной формы фермент окисляли периодатом натрия. Денатурацию белка в присутствии гуанидин гидрохлорида исследовали методами флуоресцентной спектроскопии и кругового дихроизма. Показано, что стабилизация гликозилированной формы бромелайна по сравнению с дегликозилированной формой составляет 1,9 ккал/моль. При заданной концентрации денатурирующего агента содержание денатурированного белка выше в случае дегликозилированной формы бромелайна. Дегликозилированная форма бромелайна более чувствительна к действию гуанидин гидрохлорида, что свидетельствует о роли углеводной части гликопротеина в стабилизации структуры фермента.

Текст статьи

Пожалуйста, введите код, чтобы получить PDF файл с полным текстом статьи: