БИОХИМИЯ, 2003, том 68, вып. 9, с. 1271–1279
УДК 577.152.3
Выявление белков, взаимодействующих с Na,K-ATPазoй
Кафедра биохимии Биологического факультета МГУ им. М.В. Ломоносова
Поступила в редакцию 11.12.2002
После доработки 12.03.2003
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: Na,K-ATPаза, белок-белковые взаимодействия, иммунопреципитация, бифункциональные сшивающие реагенты, протеин-оверлэй.
Аннотация
C использованием трех методов (иммунопреципитация, протеин-оверлэй и «сшивание» белков бифункциональными химическими реагентами) выявлены белки, взаимодействующие с Na,K-ATPазой α1β1-типа из наружного медуллярного слоя почек свиньи и солевых желез утки. Иммунопреципитация проводилась после солюбилизации белков гомогената тритоном Х-100, что позволяет обнаружить мембранные и цитозольные белки, образующие комплексы с Na,K-ATPазой. Два других метода были использованы для изучения взаимодействия белков цитозольной фракции с очищенной Na,K-ATPазой. Наборы белков, взаимодействующие с Na,K-ATPазой и обнаруженные с помощью каждого метода в медуллярном слое почек, различаются. При использовании метода иммунопреципитации обнаружены белки, имеющие молекулярную массу 10, 15, 70, 75, 105, 120 и 190 кДа, при сшивании белков цитозоля с очищенной Na,K-ATPазой бифункциональными химическими реагентами выявлены белки с молекулярными массами 25, 35, 40, 58, 68–70, 77 и 86–88 кДа. Методом протеин-оверлэй в той же ткани выявляются белки с молекулярными массами 38, 42, 43, 58, 60, 62, 66, 70 и 94 кДа.
Текст статьи
Сноски
* Адресат для корреспонденции и запросов оттисков.