Неферментативное взаимодействие продуктов реакции и субстратов в катализе пероксидазой

1 Кафедра химической энзимологии Химического факультета МГУ им. М.В. Ломоносова

2 Институт биохимии им. А.Н. Баха РАН

3 Department of Chemistry, Chemical Engineering and Materials Science, Polytechnic University

4 Кафедра химии Российской экономической академии им. Г.В. Плеханова

Поступила в редакцию 24.10.2002

КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: пероксидаза табака, медиатор, фенол, резорцин, вератровый спирт.

Аннотация

На примере системы, включающей в себя пероксидазу табака, субстрат-медиатор (2,2′-азино-бис(3-этилбензтиазолин-6-сульфонат) аммония (АБТС)) и трудноокисляемый ферментом субстрат, разработан подход для количественной оценки неферментативного взаимодействия продукта окисления АБТС со вторым субстратом. В основе подхода лежит установление псевдостационарной концентрации продукта окисления АБТС в процессе соокисления с трудноокисляемым субстратом. Предложены математическое описание кинетических кривых, допускающее линеаризацию данных, и расчет константы скорости такого взаимодействия. Константы скорости взаимодействия продукта окисления АБТС с трудноокисляемым субстратом, рассчитанные из данных стационарной кинетики, составили 360 ± 40 М^–1 · с^–1 для фенола и 770 ± 60 М^–1 · с^–1 для резорцина. Полученные значения констант имеют один порядок с константой скорости взаимодействия вератрового спирта и катион-радикала АБТС, вычисленной из электрохимических экспериментов (170 М^–1 · с^–1) группой Д. Лича. Однако кинетические кривые совместного окисления АБТС и вератрового спирта пероксидазой табака отличаются наличием ярко выраженного индукционного периода, который свидетельствует либо о достаточно высокой скорости неферментативного взаимодействия радикала АБТС и вератрового спирта и, таким образом, об ошибочности электрохимического метода определения константы скорости, либо о ферментативном характере процесса совместного окисления двух субстратов.

Текст статьи

Сноски

* Адресат для корреспонденции и запросов оттисков.