БИОХИМИЯ, 2003, том 68, вып. 9, с. 1216–1225
УДК 577.152.1
Химическая модификация существенных для катализа функциональных групп NAD-зависимой гидрогеназы из Ralstonia eutropha H16
1 Институт биохимии им. А.Н. Баха РАН
2 Институт микробиологии РАН
Поступила в редакцию 17.09.2002
После доработки 25.10.2002
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: NAD-зависимая гидрогеназа из Ralstonia eutropha, химическая модификация, гидрогеназная активность, диафоразная активность.
Аннотация
Проведена химическая модификация специфическими реагентами His- и Cys-аминокислотных остатков NAD-зависимой гидрогеназы из водород-окисляющих бактерий Ralstonia eutropha H16. Показано, что неактивированная форма гидрогеназы содержит остатки His, модификация которых приводит к падению как гидрогеназной, так и диафоразной каталитических активностей фермента. Активация гидрогеназы NADH в анаэробных условиях приводит к дополнительной модификации существенного только для гидрогеназной активности остатка (или остатков) His. Скорость падения диафоразной активности при этом не меняется. Модификация тиоловых групп неактивированного фермента не влияет на активность гидрогеназы. Действие тиол-модифицирующих агентов на активированную гидрогеназу сопровождается инактивацией как диафоразных, так и гидрогеназных активностей. Степень модификации и изменение соответствующих каталитических активностей зависят от условий активации фермента. Эксперименты по модификации цистеиновых и гистидиновых остатков гидрогеназы указывают на значительные конформационные изменения, происходящие в белковой глобуле в результате активации фермента.
Текст статьи
Сноски
* Адресат для корреспонденции и запросов оттисков.