БИОХИМИЯ, 2003, том 68, вып. 9, с. 1208–1215

УДК 577.152.6

Свойства рекомбинантной интегразы штамма BRU вируса иммунодефицита человека первого типа

© 2003 Е.А. Семенова, Н.М. Гашникова, Т.В. Ильина, Т.Р. Проняева, А.Г. Покровский *

Институт молекулярной биологии Государственного научного центра вирусологии и биотехнологии «Вектор»

Поступила в редакцию 01.08.2002

КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: интеграза, вирус иммунодефицита человека первого типа, штамм Bru, ауринтрикарбоновая кислота.

Аннотация

Интеграция ДНК вируса иммунодефицита человека первого типа (ВИЧ-1) в геном клетки-хозяина осуществляется вирус-кодируемым белком – интегразой. Сконструирован вектор экспрессии интегразы штамма Bru ВИЧ-1 на основе pET15b. Выделен рекомбинантный фермент в бактериальной системе экспрессии (Escherichia coli). Определили основные кинетические параметры (Km = (3,7 ± 0,2) · 10–10 М, kcat = (1,2 ± 0,3) · 10–7 c–1) интегразы ВИЧ-1, используя в качестве специфического субстрата олигонуклеотидный дуплекс, сконструированный на основе U5-концевой последовательности провирусной ДНК ВИЧ-1. Определены параметры ингибирования интегразы ауринтрикарбоновой кислотой: [I]50 = 6,3 ± 0,4 мкМ. Проведено исследование активности фермента в зависимости от концентрации ионов Mg2+ и Mn2+.

Текст статьи

Пожалуйста, введите код, чтобы получить PDF файл с полным текстом статьи:

captcha

Сноски

* Адресат для корреспонденции и запросов оттисков.