Гликозаминогликановое микроокружение гиалуронидазы в регуляции ее эндогликозидазной активности

Аннотация

Гликозаминогликановое микроокружение тестикулярной гиалуронидазы моделировалось многоточечным ковалентным присоединением гликанов к ферменту в результате активации бензохиноном. За эффективностью их связывания следили гель-хроматографически, ультрафильтрационно, титрованием поверхностных аминогрупп белка, электрофоретически, по величине остаточной эндогликозидазной активности и ее ингибированию гепарином. Сополимерные гликозаминогликаны как дерматансульфат и гепарин инактивировали эндогликозидазную активность гиалуронидазы, очевидно, в результате C-5 эпимеризации остатка гексуроновой кислоты. Отмечена важность для специфичности гиалуронидазы присутствия остатка глюкуроновой кислоты и в меньшей степени N-ацетилглюкозамина. Хондроитинсульфатное микроокружение гиалуронидазы придавало ей резистентность к гепариновому ингибированию в результате сходства экваториальной ориентации OH групп с таковой у гиалуроновой кислоты. Сульфатирование гликановой цепи, повышая ее жесткость, затрудняло стабилизирующее воздействие на гиалуронидазу, что было продемонстрировано в модельных экспериментах с декстраном и декстрансульфатом. Влияние хондроитинсульфата на эндогликозидазную активность гиалуронидазы носило аддитивный характер и не затрагивало напрямую небольшой, лежащий на дне щели участок активного центра биокатализатора. Гликозаминогликановое микроокружение гиалуронидазы, содержащее остаток идуроновой кислоты, α1–3 и α1–4 гликозидную связь инактивирует гиалуронидазную активность фермента, тогда как простые полимерные глюкоз- и галактозаминогликаны способствуют ее проявлению благодаря сходной схеме соединения звеньев β(1e–4e), β(1e–3e). Выяснение тонкого характера этих взаимодействий требует исследования влияния на гиалуронидазу олигомерных гликозаминогликановых фрагментов и их производных.

Текст статьи

Пожалуйста, введите код, чтобы получить PDF файл с полным текстом статьи: