БИОХИМИЯ, 2003, том 68, вып. 6, с. 777–782
УДК 577.152.3
Функциональное значение консервативного остатка Gly127 бифункциональной тирозиновой фосфатазы человека
Key Laboratory of Structural Biology, School of Life Sciences, University of Science and Technology of China
Поступила в редакцию 01.10.2002
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: VHR, направленный мутагенез, стационарная кинетика, PTP-петля, подвижность.
Аннотация
Используя технику направленного мутагенеза и кинетические методы, исследовали функциональное значение консервативного остатка Gly127 фосфатазы человека VHR – фермента, родственного фосфатазе вируса коровьей оспы H1. Замена Gly127 на Ala и Pro приводит к существенному снижению kcat/Km и увеличению Ki, указывая на то, что даже незначительные изменения в области Gly127 приводят к существенным изменениям связывания субстрата и каталитической активности. Значительное снижение величины kcat/Km и увеличение Ki по сравнению с ферментом дикого типа наблюдалось в случае делеции Gly127. Эти данные показали, что конформационные изменения в области PTP-петли также влияют на активность VHR. Наши результаты позволяют предполагать, что подвижность PTP-петли в молекуле VHR, возможно, контролируется наиболее подвижным остатком Gly127 и даже небольшие изменения подвижности данной петли могут влиять на связывание субстрата и каталитическую активность фермента.
Текст статьи
Сноски
* Адресат для корреспонденции и запросов оттисков.