БИОХИМИЯ, 2003, том 68, вып. 3, с. 328–335
УДК 577.122
α-Кристаллин способствует сборке тримерной формы Hsp16.3 в бесклеточной системе синтеза белка*
Department of Biological Science and Biotechnology, School of Life Science, Tsinghua University, The Protein Science Laboratory of the Education Ministry
Поступила в редакцию 06.09.2002
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: маленький белок теплового шока 16.3, α-кристаллин, функционирующая in vitro система транскрипции/трансляции, фолдинг белка.
Аннотация
Объектом исследований служил Hsp16.3 – маленький белок теплового шока из Mycobacterium tuberculosis, обладающий структурой типа «тример тримеров» и действующий in vitro как молекулярный шаперон. Изучены механизмы сборки этого олигомерного белка с использованием функционирующих in vitro систем транскрипции/трансляции. Совместное использование электрофореза в ПААГ с градиентом по размеру пор при неденатурирующих условиях и гель-проникающей хроматографии позволило сделать заключение, что преобладающей олигомерной формой Hsp16.3, продуцированного в функционирующей in vitro системе транскрипции/трансляции, является тример. Показано, что α-кристаллин (молекулярный шаперон) в значительной степени благоприятствует сборке тримера Hsp16.3, однако не способен обеспечить переход тримерной формы в нонамерную. В функционирующей in vitro системе экспрессии детектируется также «инертный» Hsp16.3-димер, который, по-видимому, не участвует в сборке тримера, а вовлекается в процесс формирования других форм Hsp16.3. Появлению первых детектируемых олигомерных форм Hsp16.3 предшествует лаг-период протяженностью ~10 мин. Это свидетельствует о том, что сборка Hsp16.3 не может протекать котрансляционно.
Текст статьи
Сноски
* Ускоренная публикация.
** Адресат для корреспонденции и запросов оттисков.