БИОХИМИЯ, 2003, том 68, вып. 2, с. 212–217
УДК 577.152.3
Основные характеристики монофункциональной флавокиназы Bacillus subtilis
Отделение молекулярной и радиационной биофизики Санкт-Петербургского института ядерной физики им. Б.П. Константинова РАН
Поступила в редакцию 13.12.2001
После доработки 08.04.2002
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: монофункциональная флавокиназа, Bacillus subtilis, физико-химические свойства.
Аннотация
Впервые исследованы основные характеристики монофункциональной рибофлавинкиназы В. subtilis – фермента, осуществляющего ключевую реакцию в биосинтезе флавинов – АТР-зависимое фосфорилирование рибофлавина с образованием флавинмононуклеотида. Установлено, что фермент, активной формой которого является мономер с молекулярной массой около 26 кДа, строго специфичен относительно восстановленной формы рибофлавина. Для проявления максимальной активности фермента необходимо присутствие АТР и Mg2+. Ионы Mg2+ могут частично заменяться в реакции фосфорилирования рибофлавина ионами других двухвалентных металлов, эффективность которых падает в ряду Mg2+ > Mn2+ > Zn2+, а Co2+ и Ca2+ обладают ингибирующим действием. Оптимальными условиями для проявления активности флавокиназы являются рН 8,5 и температура 52°. АТР может быть частично заменен другими трифосфатами, донорская активность которых образует следующую последовательность: АТР > dАТР > СТР > UТP. Константы Михаэлиса для рибофлавина и АТР оказались равными 0,15 и 112 мкМ. Десятикратный избыток по сравнению с рибофлавином его аналога 7,8-диметил-10-(О-метил-ацетоксим)-изоаллоксазина приводит к 30%-ному снижению активности фермента. Присутствие других аналогов рибофлавина существенного влияния на активность фермента не оказывает.
Текст статьи
Сноски
* Адресат для корреспонденции и запросов оттисков.