БИОХИМИЯ, 2003, том 68, вып. 1, с. 125–132

УДК 577.123

Регуляторный С-белок системы модификации–рестрикции EcoRV

© 2003 Л.А. Железная 1, Д.Е. Кайнов 1, А.К. Юнусова 1, Н.И. Матвиенко 2*

1 Институт теоретической и экспериментальной биофизики РАН

2 Институт белка РАН

Поступила в редакцию 05.12.2001
После доработки 05.02.2002

КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: системы модификации–рестрикции, С. EcoRV, ДНК-связывающие белки, торможение в геле, футпринтинг.

Аннотация

Продукт гена C системы модификации–рестрикции PvuII связывается с промотором своего гена (С-бокс) и стимулирует транскрипцию собственного гена и гена эндонуклеазы в виде полицестронной мРНК. Согласно нашим данным этот механизм регуляции функционирует в системе EcoRV. Перед геном эндонуклеазы EcoRV обнаружены два кодона ATG, которые открывают две рамки считывания (ORF1 и ORF2), заканчивающиеся в одной и той же точке внутри эндонуклеазного гена. Клонированы два фрагмента ДНК, соответствующие ORF1 и ORF2, и получены гомогенные препараты кодируемых ими белков, которые являются ДНК-связывающими белками. Методом футпринтинга с использованием ДНКазы I определена последовательность ДНК внутри ORF1, с которой связываются белки (С-бокс). Подобно С-боксу системы PvuII С-бокс системы EcoRV содержит тандемный повтор из 11 нуклеотидов, разделенный четырьмя нуклеотидами. Каждая из повторяющихся последовательностей в свою очередь содержит инвертированный повтор четырех крайних нуклеотидов. Нуклеотидная последовательность С-бокса системы EcoRV отличается как от последовательности С-бокса системы PvuII, так и от предсказанной консенсусной последовательности С-боксов в ряде других систем модификации–рестрикции.

Текст статьи

Пожалуйста, введите код, чтобы получить PDF файл с полным текстом статьи:

captcha

Сноски

* Адресат для корреспонденции и запросов оттисков.