Выделение, частичная очистка, характеристика и тканевое распределение фенилметилсульфонилфторид-ингибируемой карбоксипептидазы кошки

Аннотация

Карбоксипептидаза печени котов выделена и очищена в 148 раз с выходом 27,3% хроматографией на КМ- и ДЭАЭ-целлюлозе. По данным гель-фильтрации фермент имеет молекулярную массу 100–110 кДа, проявляет максимальную активность при pH 5,5–5,75, полностью ингибируется фенилметилсульфонилфторидом (ФМСФ) и п-хлормеркурибензоатом, частично – иодацетамидом. ЭДТА, 2-меркаптоэтанол, N-этилмалеимид, ионы Co²⁺, Ca²⁺, ингибитор основных металлокарбокси­пептидаз гуанидиноэтилмеркапто­янтарная кислота и ингибитор ангиотензин­превращающего фермента каптоприл не влияли на его активность. Фермент отщеплял аргинин от энкефалин-Leu5-Arg6 и дансил-Phe-Leu-Arg с образованием энкефалин-Leu5 и дансил-Phe-Leu соответственно и незначительно – лейцин от карбобензокси-Gly-Leu. Дальнейшего расщепления энкефалин-Leu5 и дансил-Phe-Leu не обнаружено. Наиболее высокая активность фермента обнаружена в надпочечниках и семенниках, на ~30% ниже – в гипофизе, еще более низкая – в печени и почках. В отделах головного мозга активность ФМСФ-ингибируемой карбоксипептидазы в 6–16 раз ниже, чем в надпочечниках, и сопоставима с активностью в почках. В головном мозге наиболее высокая активность фермента обнаруживалась в сером веществе больших полушарий и мозжечке, несколько ниже – в таламусе с гипоталамусом, стриатуме и гиппокампе. Самая низкая активность фермента в головном мозге найдена в четверохолмии, продолговатом мозге и белом веществе больших полушарий. Фермент существует преимущественно в виде растворимой формы, активность мембраносвязанной формы в зависимости от ткани составляет 7–25% от активности растворимой. Обсуждается возможность вовлечения ФМСФ-ингибируемой карбоксипептидазы в обмен биологически активных пептидов.

Текст статьи

Пожалуйста, введите код, чтобы получить PDF файл с полным текстом статьи: