БИОХИМИЯ, 2002, том 67, вып. 12, с. 1668–1675
УДК 577.112
Спонтанная диссоциация C-реактивного белка кролика
Department of Biological Sciences and Biotechnology, State-Key Laboratory of Biomembrane, Tsinghua University
Поступила в редакцию 12.02.2002
После доработки 28.04.2002
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: С-реактивный белок, модифицированный С-реактивный белок, субъединицы, электронная микроскопия, плазмон-резонансный анализ поверхности, взаимодействие липид–белок.
Аннотация
C-Реактивный белок (СРБ) состоит из пяти нековалентно связанных мономеров и играет важную роль в острой фазе. Субъединица СРБ, получаемая при денатурации и известная как модифицированный СРБ, также хорошо изучена. В настоящем исследовании мы обнаружили, что в маточном растворе частично происходит спонтанная диссоциация СРБ. Эта диссоциация имеет место только в отсутствие ионов Ca2+. В кислой среде диссоциация усиливается, а ионная сила раствора практически не влияет на степень диссоциации. Флуоресцентная спектроскопия с использованием анилинонафталинсульфоновой кислоты (АНС) в качестве метки показывает, что в процессе диссоциации экспозиция гидрофобной поверхности увеличивается. В кислой среде флуоресценция АНС также увеличивается; это позволяет предположить, что гидрофобные взаимодействия между субъединицами СРБ могут вносить вклад в стабильность его пентамерной структуры. Плазмон-резонансный анализ поверхности показывает, что в отличие от нативного СРБ, мономерный СРБ не связывается специфически с фосфатидилхолин-содержащей мембраной. По данным электронной микроскопии, мономерный СРБ связывается с отрицательно заряженным липидом с помощью электростатических взаимодействий, и такой липид может индуцировать диссоциацию СРБ вследствие кислотного pH в околомембранном двойном диффузном слое.
Текст статьи
Сноски
* Адресат для корреспонденции и запросов оттисков.