БИОХИМИЯ, 2002, том 67, вып. 12, с. 1655–1660
УДК 577.2
Инженерия белка хвостового чехла бактериофага T4*
Институт биоорганической химии им. М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова РАН
Поступила в редакцию 22.05.2002
После доработки 21.06.2002
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: бактериофаг T4, сократительный хвостовой чехол, продукт гена 18, полимеризация, фолдинг белка.
Аннотация
Продукт гена 18 (пг18, 659 аминокислотных остатков) формирует сократимый хвостовой чехол бактериофага Т4. При экспрессии в E. coli рекомбинантный белок собирается в поличехлы разной длины, что затрудняет получение кристаллов белка для определения его пространственной структуры. С целью получения растворимых мутантных форм пг18, утративших способность к сборке в поличехлы и пригодных для кристаллизации, мы при помощи нуклеазы Bal31 получили делеции в области гена 18, кодирующей последовательность Ile507–Gly530. Короткие делеции в области Ile507–Ile522 не влияют на сборку белка в поличехлы. Вследствие сбоя рамки считывания в месте делеций часто происходит терминация синтеза белка. Некоторые из фрагментов пг18, содержащие на C-конце короткие псевдослучайные последовательности, оставаясь растворимыми, утратили способность к сборке в поличехлы. Нам впервые удалось получить кристаллы растворимого фрагмента пг18, содержащего 510 остатков, который по устойчивости к трипсину сходен с нативным мономером белка.
Текст статьи
Сноски
* Авторы посвящают данную статью памяти Бориса Федоровича Поглазова.
** Адресат для корреспонденции и запросов оттисков.