БИОХИМИЯ, 2002, том 67, вып. 11, с. 1529–1538
УДК 577.121.7
Люцигенинзависимая хемилюминесценция в интактных изолированных митохондриях
Институт теоретической и экспериментальной биофизики РАН
Поступила в редакцию 24.10.2001
После доработки 28.11.2001
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: люцигенин, супероксидный анион, митохондрии, Ca2+, mPTP, обратный перенос электронов, комплекс III.
Аннотация
Существует большое количество данных как в поддержку, так и против использования люцигенина в качестве зонда на супероксидный анион (СА) в митохондриях, клетках и простых ферментативных системах. В настоящей работе предложено использование высоких (50–400 мкМ) концентраций люцигенина для непрерывной регистрации быстрых и обратимых изменений уровня СА в интактных изолированных митохондриях. Показаны быстрые и обратимые изменения уровня СА в присутствии люцигенина при переходе митохондрий из одного функционального состояния в другое: в условиях синтеза ATP из ADP и Pi, при аккумуляции Ca2+ и при обратном переносе электронов. В условиях индукции Ca2+-, циклоспорин A-чувствительной поры в митохондриях продемонстрировано полное подавление люцигенинзависимой хемилюминесценции (ЛЗХ). Показано, что перенос электронов в Q-цикле комплекса III дыхательной цепи, а также наличие разности электрических потенциалов на внутренней мембране митохондрий являются обязательными условиями возникновения СА-зависимой генерации хемилюминесцентного сигнала. На основании анализа собственных и литературных данных предложена схема возникновения ЛЗХ. Обсуждается механизм генерации супероксидного аниона, детектируемого в интактных митохондриях с помощью люцигенина.
Текст статьи
Сноски
* Адресат для корреспонденции и запросов оттисков.