БИОХИМИЯ, 2002, том 67, вып. 11, с. 1518–1523
УДК 577.355.2
Связывание ATP с некаталитическими центрами сопрягающего фактора хлоропластов CF1
Институт фундаментальных проблем биологии РАН
Поступила в редакцию 23.10.2001
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: сопрягающий фактор CF1, некаталитические центры, хлоропласты.
Аннотация
Исследовали кинетику связывания ATP с некаталитическими центрами сопрягающего фактора хлоропластов CF1. Восстановление дисульфидного мостика в γ-субъединице CF1 не оказывало заметного влияния на связывание ATP. Кинетика заполнения некаталитических центров ATP описывается уравнением первого порядка, учитывающим два вакантных нуклеотидсвязывающих центра, различающихся кинетическими свойствами. Зависимость скорости связывания ATP от концентрации позволяет предположить, что прочному связыванию предшествует стадия быстрого и обратимого связывания нуклеотида. Предварительная инкубация CF1 c Mg2+ снижает скорость связывания ATP. Диссоциация ATP с некаталитических центров описывается уравнением первого порядка для одного типа центров с константами скорости диссоциации kd(ATP) ≅ 10–3 мин–1. Результаты исследования показывают, что некаталитические центры CF1 негомогенны. Один из центров удерживает основную часть эндогенного ADP после осаждения фермента сульфатом аммония. Два других центра различаются кинетическими параметрами и сродством к ATP. Анионы фосфата, сульфита и особенно пирофосфата ингибируют взаимодействие ATP с некаталитическими центрами.