БИОХИМИЯ, 2002, том 67, вып. 8, с. 1122–1129

УДК 577.127.3

Специфическое связывание интегрина αIIbβ3 с RGD-пептидом, иммобилизованным на чипе с нитрилотриуксусной кислотой: исследование поверхностным плазмонным резонансом

© 2002 Й.-Дж. Лу, Ф. Жэнг, С.-Ф. Суи *

Department of Biological Sciences and Biotechnology, State-Key Laboratory of Biomembrane, Tsinghua University

Поступила в редакцию 04.12.2001
После доработки 16.01.2002

КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: нитрилотриуксусная кислота, поверхностный плазмонный резонанс, RGD, интегрин αIIbβ3, (His)6-пептиды.

Аннотация

Нитрилотриуксусная кислота обычно используется для очистки белков по их высокому сродству к (His)6-последовательности в присутствии Ni2+. В данной работе мы представляем чип с нитрилотриуксусной кислотой (NTA-чип), приготовленный переносом липидного монослоя с NTA-дипальмитоилфосфат­идилглицеролом на золотую пленку толщиной 50 нм, нанесенную на стекло. Способность связываться с поверхностью белков с (His)6-последовательностью и регенерация NTA-чипа были охарактеризованы с синтетическим пептидом P1 – (His)6-ε-амногесаноат-Gly-Gly-Arg-Gly-Asp-Ser. Действие двухвалентных катионов на аффинность связывания для RGD-лигандов было исследовано после иммобилизации P1 на датчике. Полученные результаты показывают, что NTA-чип является подходящим устройством для иммобилизации (His)6-белков на поверхности и может обеспечить функциональную ориентацию для дальнейших исследований. Показано также, что снятие Ca2+ с низкоаффинных мест связывания или добавление Mn2+ могут увеличить способность интегрина к связыванию с RGD.

Текст статьи

Пожалуйста, введите код, чтобы получить PDF файл с полным текстом статьи:

captcha

Сноски

* Адресат для корреспонденции и запросов оттисков.