БИОХИМИЯ, 2002, том 67, вып. 8, с. 1116–1121
УДК 577.127.2
Очистка и характеристика биливердина IXα из желчи лосося (Salmon salar)
1 Key Laboratory of Marine Biology, Faculty of Science, Shantou University
2 Department of Zoology, University of Toronto
Поступила в редакцию 18.11.2001
После доработки 14.01.2002
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: биливердин, деградация гема, биливердинредуктаза, билирубин, лосось.
Аннотация
Биливердин IXα был очищен из желчи лосося Salmon salar c с использованием колоночной хроматографии на силикагеле (Wakogel C-200). Выход (при степени очистки 95,3%) составил 49,5 мг на 100 мл свежей желчи. Биливердин IXα при хранении замороженной желчи при –80° стабилен не менее 40 дней, а при хранении желчи при 4° в течение 20 дней теряется 7,1% этого вещества. По данным тонкослойной хроматографии очищенный биливердин IXα представлен одним пятном с Rf 0,25–0,27. Чистоту препарата подтверждает и один главный пик при ВЭЖХ (в диапазоне от 436 до 650 нм). При ферментативном восстановлении биливердина IXα высокоочищенной биливердинредуктазой появлялись две изобестические точки – при 384 и 670 нм. При экстрагировании продуктов реакции и биливердина IXα бутанолом наблюдали один пик при 468 нм. Динамика катализируемого биливердинредуктазой восстановления биливердина IXα до билирубина IXα зависит от восстановленного NAD(P)H. Динамика NADPH- и NADH-зависимой реакций различается между собой. Однако в обоих случаях при восстановлении 1 моля биливердина IXα расходуется 1 моль восстановленного кофермента (NAD(P)H).
Текст статьи
Сноски
* Адресат для корреспонденции и запросов оттисков.