БИОХИМИЯ, 2002, том 67, вып. 7, с. 967–972

УДК 577.152.3

Новая внеклеточная рибонуклеаза из Bacillus intermedius биназа II. Выделение и некоторые свойства фермента

© 2002 М.А. Скворцова 1*, А.Л. Бочаров 2, Г.И. Яковлев 2, Л.В. Знаменская 1

1 Кафедра микробиологии Казанского государственного университета

2 Институт молекулярной биологии им. В.А. Энгельгардта РАН

Поступила в редакцию 12.07.2001
После доработки 15.04.2002

КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: Bacillus intermedius, Bacillus subtilis, биназа II, РНКаза Bsn, биосинтез, очистка фермента.

Аннотация

Рекомбинантный фермент биназа II был выделен из культуральной жидкости штамма Bacillus subtilis 3922, трансформированного плазмидой pJF28, несущей ген birB. С использованием осаждения полиэтиленгликолем, хроматографии на ДЭАЭ-целлюлозе, гепаринсефарозе и TSK-геле Toyopearl получен фермент со степенью очистки 142 и удельной активностью 1633 ед. на 1 мг белка. Биназа II имеет молекулярную массу 30 кДа, активируется ионами Mg2+ и практически полностью ингибируется ЭДТА. Оптимум реакции гидролиза РНК находится при pH 8,5. Свойства фермента близки к параметрам РНКазы Bsn из B. subtilis. Характер расщепления биназой II синтетических одно- и двунитевых полирибонуклеотидов позволяет предположить, что фермент связывает субстрат в спиральной конформации и по механизму действия, вероятно, сходен с РНКазой VI из яда кобры.

Текст статьи

Пожалуйста, введите код, чтобы получить PDF файл с полным текстом статьи:

captcha

Сноски

* Адресат для корреспонденции и запросов оттисков.