БИОХИМИЯ, 2002, том 67, вып. 7, с. 948–952
УДК 577.152.1
Выделение и кинетические свойства лактатдегидрогеназы из скелетных мышц ящерицы Agama stellio stellio
Department of Biological Scienes, Yarmouk University
Поступила в редакцию 25.06.2001
После доработки 10.12.2001
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: лактатдегидрогеназа, скелетные мышцы, ящерица, Agama stellio stellio.
Аннотация
Изофермент лактатдегидрогеназы ЛДГ-5 (M4) выделен из скелетных мышц теплокровной ящерицы Agama stellio stellio и очищен до гомогенного состояния хроматографией на колхицинсефарозе и термоинактивацией. При электрофорезе очищенного фермента в присутствии Ds-Na выявлена единственная полоса, соответствующая молекулярной массе 36 кДа. Значения Km для пирувата, NADH, лактата и NAD+ равны соответственно 0,020, 0,040, 8,1 и 0,02 мМ. Максимальная активность фермента наблюдается при концентрации пирувата 180 мкМ, дальнейшее увеличение концентрации пирувата приводит к снижению активности. Фермент стабилен при 70° в течение 30 мин, но быстро инактивируется при 90°. Оптимум рН для реакции превращения пирувата в лактат находится в области 7,5, для обратной реакции (лактат–пируват) pH-оптимум 9,2. Оксалат, глутамат, а также ионы Cu2+, Co2+, Mn2+ и Mg2+ оказывают ингибирующее влияние как на прямую, так и на обратную реакции.