Взаимодействие аденозиндезаминазы с ингибиторами. Модификация диэтилпирокарбонатом

1 Институт биохимии НАН РА им. Г. Бунятяна

2 Department of MCA Sciences, University of Camerino

3 Department of Chemical Sciences, University of Camerino

Поступила в редакцию 08.06.2001
После доработки 26.03.2002

КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: аденозиндезаминаза, активный центр, остатки гистидина, химическая модификация, ингибиторы аденозиндезаминазы.

Аннотация

Исследовано взаимодействие аденозиндезаминазы (аденозинаминогидролаза, ADA) из селезенки крупного рогатого скота с ингибиторами фермента: 1-деазааденозином, эритро-9-(2-гидрокси-3-нонил)аденином и эритро-9-(2-гидрокси-3-нонил)-3-деазааденином. Изучено возможное участие в этом взаимодействии остатков гистидина с использованием метода селективной химической модификации диэтилпирокарбонатом. Использование графического метода Тсоу позволяет утверждать, что из шести модифицируемых в присутствии диэтилпирокарбоната остатков гистидина для активности ADA важен один. Возможность инактивации (хотя и замедленной) модификатором фермента, находившегося в комплексе с каждым из ингибиторов, показывает, что адениновая часть ни одного из ингибиторов (и, следовательно, субстрата) не связывается с остатком гистидина активного центра, предотвращая его модификацию. Отсутствие значительных изменений в величинах констант диссоциации комплексов фермент–ингибитор модифицированного и контрольного препаратов свидетельствует о том, что по крайней мере наиболее доступные остатки гистидина, модифицированные в наших экспериментах, не принимают участие в связывании ингибиторов, являющихся производными аденозина или эритро-9-(2-гидрокси-3-нонил)аденина.

Текст статьи

Сноски

* Адресат для корреспонденции и запросов оттисков.