Интенсивность свободнорадикальных процессов и регуляция активности цитоплазматической NADP-изоцитратдегидрогеназы в кардиомиоцитах крысы в норме и при ишемии

1 Кафедра аналитической и медицинской биохимии и микробиологии Биолого-почвенного факультета Воронежского государственного университета

2 Кафедра биофизики и биотехнологии Биолого-почвенного факультета Воронежского государственного университета

3 Кафедра биохимии и биотехнологии. Научный центр Биологических и Геологических наук. Биологический факультет Университета Мадейры

Поступила в редакцию 10.05.2001
После доработки 02.01.2002

КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: сердце крысы, норма и ишемия, свободнорадикальные процессы, NADP-изоцитратдегидрогеназа, свойства, регуляция активности.

Аннотация

Исследованы интенсивность свободнорадикальных процессов и регуляция активности NADP-изоцитратдегидрогеназы (КФ 1.1.1.42; NADP-ИДГ) в цитоплазматической фракции миокарда крысы в норме и при ишемии. Параметры хемилюминесценции: светосумма медленной вспышки (S) и тангенс угла наклона кинетической кривой (tgα₁), отражающие степень развития свободнорадикальных процессов, возрастали при ишемии в 2,1 и 20,0 раз соответственно. Интенсивность медленной вспышки (I_max) увеличивалась в 22 раза. Содержание продуктов пероксидного окисления липидов – диеновых конъюгатов и малонового диальдегида, возрастало в 11,9 и 4,7 раз соответственно, что свидетельствует о выраженном оксидативном стрессе. С использованием гомогенных ферментных препаратов NADP-ИДГ, выделенных из нормального и подвергнутого экспериментальной ишемии миокарда крысы, осуществлена сравнительная характеристика ряда каталитических свойств фермента в норме и при патологии. NADP-ИДГ из нормального и ишемизированного миокарда имела одинаковую электрофоретическую подвижность и сходные регуляторные свойства по отношению к ионам Fe²⁺, Cu²⁺, Zn²⁺, а также сукцинату и фумарату. В то же время для NADP-ИДГ в норме и ишемии характерны различные сродство к субстратам, чувствительность к ингибирующему действию пероксида водорода, восстановленного глутатиона, ионов Ca²⁺. Эффект синергизма при ингибировании фермента ионами Fe²⁺ и H₂O₂ при ишемии выражен в меньшей степени. Продукт реакции – 2-оксоглутарат оказывает более сильный ингибирующий эффект в норме, чем при ишемии (K_i составляют 0,22 и 0,75 мМ соответственно). Предполагается, что выявленные особенности регуляции активности NADP-ИДГ при ишемии могут способствовать стимуляции функционирования фермента в условиях возрастания уровня свободнорадикальных процессов, что может иметь значение для обеспечения NADPH глутатионредуктазной/глутатионпероксидазной антиоксидантной системы кардиомиоцитов.

Текст статьи

Сноски

* Адресат для корреспонденции и запросов оттисков.