Вискозиметрический метод определения общей эндодеполимеразной активности пектиназ

Аннотация

Предложен усовершенствованный метод определения общей эндодеполимеразной активности пектиназ, основанный на измерении вязкости раствора цитрусового пектина в вискозиметре Оствальда в присутствии фермента. Метод позволяет детектировать деполимеризующее действие таких ферментов, как полигалактуроназа, полиметилгалактуроназа, пектинлиаза и пектатлиаза. За единицу эндодеполимеразной активности принята активность такого количества фермента, которое приводит к 50%-ному уменьшению относительной вязкости раствора цитрусового пектина (0,5%) за 5 мин реакции при 40° и соответствующем pH. В зависимости от того, в каком диапазоне pH ферменты проявляют максимальную активность, предложены две модификации метода: для кислых пектиназ, pH 5,0, и нейтральных (слабощелочных) пектиназ, pH 8,0. Модификации отличаются способами контроля и расчета активности. Применимость метода продемонстрирована на примере шести ферментных препаратов. Используемый для расчета ферментативной активности параметр прямо пропорционален концентрации ферментного препарата в широком диапазоне (соответствующая зависимость линейна при варьировании концентрации фермента, по меньшей мере в 10 раз). Относительная ошибка метода не превышает 10%.

Текст статьи

Пожалуйста, введите код, чтобы получить PDF файл с полным текстом статьи: