Инактивация и частичное разворачивание лактатдегидрогеназы из сердца свиньи под действием п-хлормеркурибензоата

Аннотация

Исследованы процессы инактивации и разворачивания лактатдегидрогеназы из сердца свиньи в присутствии п-хлормеркурибензоата (пХМБ). С увеличением соотношения пХМБ : фермент наблюдалось постепенное ингибирование фермента. Практически полная инактивация достигалась при соотношении пХМБ : фермент, равном 20 : 1. Анализ препаратов фермента методом нативного электрофореза в полиакриламидном геле показал, что с увеличением соотношения пХМБ : фермент интенсивность полос нативного фермента уменьшается до полного исчезновения. В то же время наблюдаются появление и увеличение интенсивности множественных полос неактивного фермента, что говорит о разворачивании молекулы лактатдегидрогеназы. Конформационные изменения в молекуле фермента под действием пХМБ исследовались путем регистрации спектров флуоресценции, дифференциальных спектров поглощения в ультрафиолетовой области, а также спектров кругового дихроизма (КД). Увеличение концентрации пХМБ приводило к ослаблению интенсивности флуоресценции. В дифференциальных УФ-спектрах при увеличении концентрации ингибитора наблюдалось увеличение поглощения в области 240 нм. Эти данные свидетельствуют о конформационных изменениях в молекуле фермента. Изменения спектров КД свидетельствуют также об изменении вторичной структуры белка. Полученные результаты показали, что пХМБ не только ингибирует фермент, но и влияет на его конформацию, вызывая частичное разворачивание молекулы.

Текст статьи

Пожалуйста, введите код, чтобы получить PDF файл с полным текстом статьи: