Везикулярный транспорт внеклеточных кислых фосфатаз у дрожжей Saccharomyces cerevisiae

Аннотация

Разработан метод выделения секреторных везикул из дрожжей Saccharomyces cerevisiae, основанный на осмотическом лизисе протопластов с последующим разделением везикул в градиенте плотности Урографина. Получены два типа секреторных везикул, различающиеся по удельной плотности и фактуре поверхности. В качестве маркеров секреторных везикул использовали кислые фосфатазы (КФ 3.1.3.2). Показано, что конститутивная кислая фосфатаза (продукт гена PHO3) транспортируется к поверхности клетки преимущественно с помощью менее плотных везикул, а репрессибельная (гетеромер, кодируемый генами PHO5, PHO10 и PHO11) – с помощью более плотных. Эти данные указывают на существование по крайней мере двух путей транспорта секреторных белков между местом синтеза и созревания и поверхностью клетки. Для выявления возможных причин различного адресования Pho3p и Pho5p/Pho10p/Pho11p были получены везикулы из штаммов, синтезирующих гомомерные формы репрессибельной кислой фосфатазы. Показано, что за выбор пути транспорта репрессибельной кислой фосфатазы, по-видимому, отвечают гликопротеины, кодируемые PHO10 и/или PHO11 генами. Определена корреляционная зависимость между процессом почкообразования и секрецией гомомерных ферментов. Высокая степень корреляции между процессом почкообразования и секрецией фосфатазы Pho5p и отсутствие корреляции между почкообразованием и секрецией минорных фосфатаз Pho10p и Pho11p может указывать на различную функциональную роль полипептидов, входящих в состав полной репрессибельной кислой фосфатазы.

Текст статьи

Пожалуйста, введите код, чтобы получить PDF файл с полным текстом статьи: