БИОХИМИЯ, 2002, том 67, вып. 3, с. 413–421
УДК 577.151.03
Окислительная модификация белков: окисление триптофана и образование битирозина в очищенных белках с использованием системы фентона
1 Психоневрологический научно-исследовательский институт им. В.М. Бехтерева
2 Санкт-Петербургская государственная медицинская академия им. И.И. Мечникова
Поступила в редакцию 19.02.2001
После доработки 30.05.2001
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: окислительная модификация белков, битирозиновые сшивки, супероксиддисмутаза, человеческий сывороточный альбумин, гидроксильный радикал, перекись водорода, радикальные ловушки, CO3•−.
Аннотация
Проанализированы особенности металл-катализируемого окисления (МКО) очищенных белков (сывороточного альбумина и эритроцитарной супероксиддисмутазы человека) по степени окисления триптофана и тирозина. Образование битирозиновых сшивок и окисление триптофановых остатков регистрировали с помощью флуоресценции. Выявлена зависимость интенсивности окислительной модификации аминокислотных остатков белков от концентрации компонентов среды Фентона и времени инкубации. Характер этих изменений имеет свои особенности для разных белков. Методом электрофореза и гель-проникающей хроматографии на примере супероксиддисмутазы показаны структурные изменения, обусловленные ее окислительной модификацией и сопровождающиеся снижением активности фермента. Результаты, полученные с использованием ловушек для радикала ОН• (маннитола и этанола), позволяют сделать предположение о том, что окислительная модификация белков в среде Фентона может быть связана не только с гидроксильным радикалом, но и с феррил- и перферрил-ионами, а также с радикалом CO3•−.
Текст статьи
Сноски
* Адресат для корреспонденции и запросов оттисков.