Разобщение мономеризующей и лизоцимной активностей дестабилазы секрета слюнных желез медицинской пиявки

Аннотация

При исследовании бифункциональности дестабилазы, эндо-ε-(γ-Glu)-Lys-изопептидазы, в качестве источника ее использовали секрет слюнных желез медицинской пиявки (Hirudo medicinalis). Поскольку секрет, получаемый известным способом, описанным Ригби и сотр. (1987), (секрет-К) не проявляет характерную для дестабилазы высокоспецифическую изопептидазную (Д-димер мономеризующую) активность, так как обладает разрушающей ее протеолитической активностью (субстрат Glp-Ala-Ala-Leu-pNА), которая обусловлена примесями содержимого кишечного канала пиявки, нами был разработан новый способ получения истинного пиявочного секрета (секрет-И). Он отличается полным отсутствием содержимого кишечного канала пиявки и лишен протеолитической активности. При фракционировании секрета-И с помощью HPLC гель-фильтрации через суперозу S-12 впервые удалось разобщить характерные для дестабилазы Д-димер мономеризующую и лизоцимную активности. Разобщения этих активностей для очищенного препарата дестабилазы удалось достичь в результате обращенно-фазовой хроматографии в градиенте ацетонитрила (0–60%), содержащего 0,1% трифторацетата. Показано, что мономеризующая активность дестабилазы определяет способность секрета-И растворять стабилизированный фибрин путем изопептидолиза α-α и γ-γ цепей фибрина, соединенных ε-(γ-Glu)Lys изопептидными связями.

Текст статьи

Пожалуйста, введите код, чтобы получить PDF файл с полным текстом статьи: