БИОХИМИЯ, 2001, том 66, вып. 9, с. 1227–1237
УДК 577.214.3
Исследование dNTP-связывающего участка обратной транскриптазы ВИЧ‑1 с помощью фотореакционноспособных аналогов dNTP
1 Новосибирский институт биоорганической химии
2 Centro de Biología Molecular «Severo Ochoa», CSIC-Universidad Autonoma de Madrid
Поступила в редакцию 06.02.2001
После доработки 10.04.2001
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: обратная транскриптаза вируса иммунодефицита человека, связывание dNTP, фотосенсибилизированная модификация.
Аннотация
Исследовалось взаимодействие дезоксинуклеозид-5′-трифосфатов (dNTP) с активным центром обратной транскриптазы вируса иммунодефицита человека (ОТ ВИЧ). Определены кинетические параметры для dTTP и двух его фотореакционноспособных аналогов в реакции синтеза ДНК, катализируемой ОТ ВИЧ дикого типа и двумя ее мутантными формами, содержащими остаток аланина и триптофана в положении 115. Показано, что замена Tyr115 другими аминокислотными остатками приводит к увеличению Km для dTTP и его аналогов. Проведена фотоаффинная модификация ОТ ВИЧ и ее мутантных форм фотореакционноспособным праймером, синтезированным in situ, в двух вариантах: прямое фотоприсоединение под действием УФ-света и фотосенсибилизированная модификация с Pyr-dUTP в качестве сенсибилизатора. Использование сенсибилизатора приводит к уменьшению числа продуктов модификации и селективной модификации каталитической субъединицы ОТ ВИЧ в случае как фермента дикого типа, так и его обеих мутантных форм.
Текст статьи
Сноски
* Адресат для корреспонденции и запросов оттисков.