БИОХИМИЯ, 2001, том 66, вып. 8, с. 1026–1035
УДК 577.152.1
Рекомбинантные формы пероксидазы хрена, иммобилизованные на золотых электродах: создание П‑чипа и биферментных электродов на его основе*
1 Кафедра аналитической химии, Факультет фармацевтики университет Алкалы
2 Кафедра Химической Энзимологии Химического Факультета МГУ им. М.В. Ломоносова
3 Государственный научный центр по антибиотикам, ФГУП «ГНЦА»
Поступила в редакцию 26.01.2001
После доработки 05.03.2001
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: рекомбинантные формы пероксидазы хрена, амперометрический биосенсор, П-чип, прямой перенос электрона.
Аннотация
Исследованы адсорбционные и биоэлектрокаталитические свойства нативной пероксидазы хрена (ПХ) и ее рекомбинантных форм на золотых поликристаллических электродах. Рекомбинантные формы ПХ были получены методом генной инженерии и экспрессированы в клетках E. coli. Согласно данным кварцевых микровесов, все формы ПХ адсорбировались на поверхности золота в виде монослоя, однако, только для электродов, модифицированных рекомбинантными формами ПХ (негликозилированными), был получен высокий и стабильный амперометрический сигнал биоэлектрокаталитического восстановления H2O2 вследствие эффективного прямого переноса электрона (ПЭ) между поверхностью золота и активным центром фермента. Введение гистидиновых последовательностей в N- или C-концевые области молекулы фермента дополнительно увеличило прочность связывания фермента с поверхностью золота и эффективность прямого ПЭ. Иммобилизация рекомбинантных форм ПХ, содержащих гистидиновые функциональные группы, на поверхности золотого электрода была использована для создания П-чипа – биосенсора для определения пероксида водорода, основанного на прямом ПЭ, а также биферментного биосенсорного электрода для определения L-лизина, основанного на со-иммобилизованных рекомбинантных формах ПХ и L-лизин-α-оксидазе.
Текст статьи
Сноски
* Ускоренная публикация.
** Адресат для корреспонденции и запросов оттисков.